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病毒包装--慢病毒

发布日期:2018-01-26 浏览次数:236

慢病毒包装

技术简介

将外源基因导入目的细胞,并得到稳定的表达是细胞生物学研究中常用的实验手段。但是,对于特定类型的细胞,电转和脂质体转染往往难以取得理想的效果。使用质量有保证的慢病毒进行感染可以突破此类实验瓶颈。

欢乐时时彩 慢病毒(Lentivirus )载体是以HIV-1病毒的基本元件作为基础,剔出病毒自主复制元件,保留病毒包装必须元件,发展而来的一种基因导入工具。因此,慢病毒在保持优异感染能力的同时,具有高度的生物安全性。不同于一般的逆转录病毒,慢病毒对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,可以感染包括T淋巴细胞、造血干细胞等常规方法难于转染的细胞类型。慢病毒感染效率好,可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上达到持久性表达,是目前广受欢迎的基因功能研究工具。慢病毒从诞生至今已经发展到第三代。鉴于其具有高生物安全性的双重特性,慢病毒基因治疗在美国已经进入临床实验。由于慢病毒具有优异特性,在生物医药的研发领域得到越来越广泛的应用。

技术原理:

1. 一个表达载体,含有目的基因、目的基因的启动子以及其它病毒包装所需的必要元件;

2. 一套包含辅助质粒的包装质粒混合物,分别表达产生病毒所需的外壳蛋白和逆转录酶;

3. HEK293T细胞株,用于包装慢病毒。

欢乐时时彩 4. 包装完成的慢病毒视实验需要,进行浓缩,增加病毒滴度。

技术特点:

1. 感染宿主广泛,可以感染包括人、猩猩、小鼠、大鼠、兔、狗等所有已经研究过的哺乳动物细胞。

2. 相比传统腺病毒的瞬时转染,慢病毒能够将目的基因整合到宿主基因组,获得长期稳定地表达目的基因的细胞。

3. 可根据您的实验要求调整慢病毒载体的元件,包括广泛表达启动子(EF1a,CAG等),也包括组织特异性表达启动子、eGFP颜色荧光标记基因、化学发光标记等。

4. 可实现多顺反子共表达(多达3个基因同水平表达)和HIS/FLAG标签标记。

服务内容

1. 根据提供的基因信息设计实验;

2. 基因克隆入表达载体;

3. 病毒包装与浓缩;

欢乐时时彩 4. 提交产物及实验结果。

您需要提供以下材料:

欢乐时时彩 1. 基因序列(如若没有,我们也可以帮您进行全基因合成)。

2. 其他个性化定制要求,譬如启动子、荧光标记基团、Tag标签等选择要求。

您将获得以下结果:

1. 测定好滴度,并分装成小管的慢病毒;

2. 构建完好的带有您的目的基因的慢病毒载体;

3. 病毒滴度测定的荧光显微照片和流式细胞数据。(可选)




合肥世诚生物技术有限公司

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TA克隆,亚克隆;质粒构建,荧光定量PCR检测;RNAi干扰;miRNA检测;SNP分型;STR检测等;

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蛋白抽提,蛋白纯化,WB,Elisa,免疫组化,质谱鉴定,N端测序等。

细胞生物学技术服务项目包括:

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